教学内容
教师活动
学生活动
设计意图
导入课题
教师讲解:我们上节学习了培养基的配置以及无菌操作技术,下面来学习如何进行细菌的分离,获得所需要的目的微生物。
学生回忆专题2微生物的实验室培养里面关于培养基及无菌操作的相关知识。
创设情景,引入新课
研究思路
1、筛选菌株
1、教师让学生阅读课本P21,讲解实例:DNA多聚酶链式反应是一种在体外将少量DNA大量复制的技术,此项技术要求使用耐高温(93℃)的DNA聚合酶,因为热泉温度70~80℃,淘汰了绝大多数微生物只有Taq细菌被筛选出来。引导学生得到启示根据它对生存环境的要求,到相应的环境中去寻找(即自然界筛选)。
2、实验室中微生物的筛选原理实验室筛选:人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等),同时抑制或阻止其他微生物生长。
3、选择培养基:在微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。目的是从众多微生物中分离所需要的微生物。
4、培养基选择分解尿素的微生物的原理:培养基的氮源为尿素,只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素,以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素,缺乏氮源而不能生长发育繁殖,而受到抑制,所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。
5、教师让学生阅读课本怕1图2-6,展示各种筛选菌株方法的多媒体图片:
黄石公园热泉 海底火山
大肠杆菌显色培养基 实验室筛选SARS菌株
1、学生讨论为什么Taq细菌能从热泉中筛选出来吗?
2、学生阅读课本P22侧边栏关于本课题使用的培养基成分相关内容,讨论并回答提供碳源和氮源的分别是什么物质。
3、学生讨论培养基如何对微生物进行筛选。
4、学生观看教师展示的多媒体图片。
通过教师讲解知识点,引导学生对知识进行迁移学习,培养学生的逻辑迁移思维。
通过观看图片,使学生由感性认识过渡到理性认识。培养学生的学科素养。
2、统计菌落数目
1、直接计数法:最常用的显微镜直接计数
2、间接计数法:最常用方法稀释涂布平板法。
每克样品中的菌株数=(C÷V)×M
C:某一稀释度下平板上生长的平均菌落数
V:涂布平板时所用的稀释液的体积(ml)
M:稀释倍数
1、学生举例血球计数板属于直接计数法。
2、学生讨论并区别:稀释涂布平板法是用来计数的,而平板划线法是用来纯化的。
知识的迁移,培养学生的知识整合能力。
3、设置对照
1、对照实验是指除了被测试的条件外,其他条件都相同的实验。满足该条件的称为对照组,未满足该条件的称为实验组。设置对照的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响,提高实验结果的可信度。
2、实例:在做分解尿素的细菌的筛选与统计菌落数目的实验时,A同学筛选出约150个菌落,但其他同学只选择出约50个菌落,分析其原因。教师要求学生设计实验方案。
学生设计实验方案:
方案一:由其他同学用与A同学相同土样进行实验;
方案二:将A同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养,作为空白对照,以证明培养基是否受到污染。
小结:通过这个事例可以看出,实验结果要有说服力,对照的设置是必不可少的。
培养学生的怀疑精神,并根据自身设计实验方案进行验证。培养学生的实验设计能力。
实验设计
1、教师讲解样品的稀释和稀释液的取样培养流程示意图。
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